细胞传代PPT
细胞传代是细胞培养中一项重要的操作技术,旨在保持细胞活力和数量,以便进行进一步的实验和研究。通过传代,可以避免细胞因过度生长而衰老或死亡,保证细胞的良好状...
细胞传代是细胞培养中一项重要的操作技术,旨在保持细胞活力和数量,以便进行进一步的实验和研究。通过传代,可以避免细胞因过度生长而衰老或死亡,保证细胞的良好状态。传代步骤准备工作在传代前,确保细胞培养基、胰蛋白酶、无菌离心管、新鲜培养基等物品已准备齐全,并经过无菌处理细胞观察在显微镜下观察细胞状态,确认细胞贴壁生长良好,没有污染胰蛋白酶消化去除旧培养基,加入适量的胰蛋白酶溶液,轻轻摇晃培养瓶,使胰蛋白酶均匀覆盖细胞表面。胰蛋白酶的作用是分解细胞间的连接,使细胞从培养瓶壁上脱落细胞收集在显微镜下观察,当细胞开始变圆、脱落时,立即加入等量的新鲜培养基终止消化。用吸管轻轻吹打细胞,使其完全脱落并悬浮在培养基中细胞计数收集细胞悬液,进行细胞计数,以确定传代的细胞数量细胞分瓶根据实验需要,将细胞悬液分至新的培养瓶中,加入适量的新鲜培养基,轻轻摇晃使细胞均匀分布培养观察将培养瓶放入细胞培养箱中继续培养,并定期观察细胞生长情况注意事项严格遵循无菌操作原则避免细胞污染胰蛋白酶消化时间不宜过长以免对细胞造成损伤细胞传代过程中要保持适当的细胞密度避免过稀或过密定期检查细胞状态确保细胞健康生长通过正确的细胞传代操作,可以确保细胞的正常生长和繁殖,为后续的细胞实验提供良好的基础。